BOD（生化需氧量）測定儀通過監(jiān)測微生物降解有機物的耗氧量評估水體污染程度，其檢測精度依賴校準液的準確性。BOD校準液需模擬含可降解有機物的水體環(huán)境，且成分穩(wěn)定、濃度可控，通常分為標準儲備液（高濃度、長期保存）與工作校準液（低濃度、適配儀器量程），需遵循“無菌、避光、控溫”原則配制，避免因成分變質(zhì)或操作不當導致校準失效。

一、配制前的準備工作

1、物資與器具準備

試劑需選用基準級葡萄糖、谷氨酸（BOD校準液常用有機物，兩者按比例混合可模擬天然有機物降解特性），且在有效期內(nèi)，避免使用受潮、結(jié)塊的試劑；器具需準備容量瓶（定容用）、移液管（精準移?。?、燒杯（溶解混合）、玻璃棒（攪拌），所有器具需用蒸餾水浸泡清潔后晾干，若曾接觸過殺菌劑（如次氯酸鈉），需用無菌水反復沖洗，防止殘留殺菌劑抑制微生物活性。

此外，需準備無菌密封試劑瓶（儲存校準液，避免微生物污染）、標簽紙（標注類型、配制日期、有效期），以及無菌水（用于稀釋，不可用普通蒸餾水，需經(jīng)滅菌處理，防止雜菌影響校準）。

2、環(huán)境與安全準備

配制需在潔凈、室溫（20℃左右，接近BOD檢測標準溫度）環(huán)境中進行，避免高溫、強光直射（防止葡萄糖、谷氨酸分解）；若環(huán)境灰塵較多，需在超凈工作臺或無菌操作區(qū)進行，防止空氣中雜菌落入校準液。個人需佩戴無菌手套、口罩，避免手部細菌或飛沫污染試劑，操作時禁止交談，減少污染風險。

二、核心配制步驟

1、標準儲備液的配制

標準儲備液濃度較高，用于后續(xù)稀釋成工作液，步驟如下：

試劑稱量與溶解：按比例稱取葡萄糖與谷氨酸（兩者濃度比例需一致，確保降解特性穩(wěn)定），放入無菌燒杯中，加入適量無菌水，用無菌玻璃棒輕輕攪拌至完全溶解（避免劇烈攪拌產(chǎn)生氣泡，氣泡易攜帶雜菌）；若溶解緩慢，可將燒杯置于20℃水浴中恒溫攪拌，禁止加熱（高溫會破壞試劑結(jié)構(gòu)）。

精準定容與滅菌：將溶解后的溶液沿玻璃棒緩慢注入無菌容量瓶，用無菌水多次沖洗燒杯與玻璃棒，沖洗液全部倒入容量瓶；加無菌水至刻度線，蓋緊瓶塞顛倒搖勻，隨后將溶液轉(zhuǎn)移至無菌密封試劑瓶，進行滅菌處理（如高壓蒸汽滅菌，需按試劑耐受溫度設置，避免過度滅菌導致試劑分解）。

密封儲存：滅菌后待溶液冷卻至室溫，貼上標簽（標注“BOD標準儲備液”“配制日期”“有效期”，儲備液密封避光可保存1-2周），置于4℃冰箱冷藏，避免反復凍融導致濃度變化。

2、工作校準液的配制

工作校準液需根據(jù)bod測定儀量程配制（如儀器量程為0-200mg/L，工作液濃度可設為0mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L），步驟如下：

稀釋儲備液：用無菌移液管精準移取一定量標準儲備液，注入無菌容量瓶中，避免移液管尖端觸碰瓶壁（防止污染）；若儲備液冷藏保存，需先放置至室溫再稀釋，避免溫度差異導致體積誤差。

無菌定容與混勻：向容量瓶中加無菌水至刻度線，蓋塞后輕輕顛倒搖勻（BOD校準液需避免劇烈震蕩，防止混入過多氧氣影響后續(xù)微生物耗氧檢測），確保濃度均勻。

即時使用：工作校準液需現(xiàn)配現(xiàn)用，配制后1小時內(nèi)完成校準，避免放置時間過長導致微生物滋生（即使無菌操作，環(huán)境中仍可能有微量雜菌，長期放置會分解有機物，導致濃度下降）。

三、關鍵注意事項

1、防污染：保障校準液“無菌性”

BOD校準液的核心是模擬純凈有機物環(huán)境，雜菌會直接分解有機物，導致濃度失真：配制全程需使用無菌器具與無菌水，避免手部、空氣接觸污染；若配制過程中溶液出現(xiàn)渾濁、異味，說明已污染，需立即丟棄重新配制。

2、防分解：把控試劑穩(wěn)定性

葡萄糖、谷氨酸易受光照、高溫分解，配制時需避光操作，儲存時冷藏；稀釋時禁止加熱，若試劑溶解困難，僅可在20℃水浴中輔助溶解，防止溫度過高破壞試劑。

3、空白校準液：不可忽視的“零濃度”基準

空白校準液（0mg/L）用于消除無菌水自身耗氧影響，配制方法為直接取無菌水裝入校準瓶，無需添加任何試劑；需確?？瞻滓号c工作液滅菌、儲存條件一致，避免因空白液污染或耗氧導致校準偏差。

四、總結(jié)

BOD測定儀校準液的配制核心是“無菌、穩(wěn)定、精準”，需通過無菌操作避免雜菌污染，控制溫度與光照防止試劑分解，按量程分階段配制儲備液與工作液。只有嚴格遵循配制規(guī)范，才能確保校準液濃度準確，為BOD測定儀提供可靠校準基準，保障水體生化需氧量檢測數(shù)據(jù)的真實性。